Открытие хроматографии как метода разделения и анализа веществ принадлежит русскому ботанику М. С. Цвету, который в 1903 г. опубликовал работу, посвященную хроматографиче — скому анализу хлорофилла.
14* |
211 |
Принцип хроматографического метода разделения основан па различии в адсорбционной способности веществ, которая зависит как от природы адсорбируемых веществ, так и от природы адсорбентов. Различные вещества на одном и том же адсорбенте адсорбируются в разной степени. Это можно представить и таким образом, что при адсорбционном равновесии они неодинаковое время находятся на поверхности адсорбента. Вещество, которое адсорбируется сильнее, дольше удерживается на поверхности адсорбента. Если смесь газов или жидкий раствор пропускать через слой адсорбента — хроматографическую колонку, то из нее раньше будут выходить компоненты, которые сорбируются слабее. В процессе прохождения через слой
Адсорбента смеси веществ непрерывно совершаются акты адсорбции — десорбции, в результате которых сильносорбирую — щиеся вещества (они дольше находятся на поверхности адсорбента) «отстают» от слабосорбирующихся веществ. Очевидно, что чем толще слой адсорбента, тем эффективнее разделение. Таким образом, хроматография — это метод разделения компонентов подвижной фазы (смеси газов, раствора) при движении ее относительно другой неподвижной фазы (слоя сорбента).
Основным достоинством хроматографии является универсальность метода; он пригоден для разделения практически любых веществ. Увеличение толщины слоя адсорбента (высоты хроматографической колонки) позволяет обеспечить высокую степень разделения даже близких по свойствам веществ, ионов. Это значит, что степень разделения можно регулировать. Метод пригоден для работы с макроколичествами и микроколичествами веществ. Хроматографический метод разделения веществ легко поддается автоматизации. Эти достоинства обеспечили широкое применение хроматографии в производстве и научных исследованиях.
В промышленности хроматографию применяют для получения высокочистых веществ (редкоземельных элементов, актиноидов и др.). Хроматография"широко используется как метод физико-химического исследования. С ее помощью можно изучать термодинамику сорбции, определять молекулярные массы веществ, коэффициенты диффузии, давление паров веществ, удельные поверхности адсорбентов и катализаторов и т. д. Широкое применение хроматография получила в аналитическом контроле различных смесей веществ. Важным преимуществом хроматографии является быстрота и надежность проведения анализа.
В зависимости от агрегатного состояния подвижной фазы различают газовую и жидкостную хроматографию. В газовой хроматографии подвижной фазой является газ. Этот метод хроматографии служит для разделения летучих веществ, к которым обычно относятся вещества с молекулярной массой приблизительно до 300, и термически стойких соединений. В жидкостной хроматографии подвижной фазой служит жидкость. Она применяется для разделения нелетучих веществ с молекулярной массой от ~300 до 1000—2000, неорганических ионов и термически нестойких соединений. Таким образом, газовая и жидкостная хроматография дополняют друг друга.
Неподвижная фаза, применяемая в хроматографировании, может быть твердой и жидкой. В соответствии с этим газовую хроматографию делят на газо-адсорбционную с твердым адсорбентом в качестве неподвижной фазы и газо-жидкостную, в ко — торой неподвижной фазой служит твердый инертный носитель, поры которого заполняют жидкостью (в ходе хроматографиро — вания происходит абсорбция газа жидкостью). Аналогично жидкостную хроматографию делят на жидкостно-адсорбцион — пую (неподвижная фаза — твердый адсорбент) и -^кидкостно — жидкостную (обе фазы — жидкие).
В зависимости от механизма процесса сорбции жидкостную хроматографию классифицируют на молекулярно-адсорбцион — пую (реализуется физическая адсорбция), ионообменную (ионообменная адсорбция), распределительную (в основе — различная растворимость разделяемых компонентов в жидкостях подвижной и неподвижной фазы), осадочную (осадитель в неподвижной фазе с разделенными компонентами образует соединения с различной растворимостью в подвижной фазе), гель-хроматографию (различная проницаемость молекул разделяемых веществ в неподвижную фазу геля обусловлена размерами молекул).
По способам оформления метода хроматографию делят на колоночную и плоскостную. Плоскостная в свою очередь включает бумажную и тонкослойную хроматографию. В бумажной хроматографии в качестве адсорбента используется специальная однородная бумага, на которую наносят раствор разделяемых компонентов. Под действием капиллярных сил и диффузии отдельные компоненты движутся по поверхности бумаги с различной скоростью. В тонкослойной хроматографии применяют тонкие слои адсорбента, нанесенные на пластинку из инертного материала.
Наиболее широко используется колоночная хроматография, в процессе которой разделение веществ происходит в узкой и длинной хроматографической колонке, заполненной адсорбентом.
В зависимости от способа передвижения компонентов смеси вдоль неподвижной фазы различают три метода: прояви — тельный (элюационный), вытеснительный и фронтальный.
Проявительный (элюционный) метод заключается в том, что смесь веществ сорбируют в верхнем слое неподвижной фазы, а затем через нее пропускают элюент — нейтральный разбавитель (например, инертный газ) или вещество, сорбирующееся хуже разделяемых компонентов. В ходе элюирования компоненты выделяются отдельными зонами, которые изолированы друг от друга чистым элюентом.
Вытеснительный метод отличается от проявительного тем, что в качестве элюента применяют вытеснитель—вещество, сорбирующееся лучше разделяемых компонентов. При вытеснении разделяемые компоненты смеси выделяются примыкающими друг к другу зонами, выходящими из колонки в порядке увеличения сорбируемости компонентов.
При фронтальном методе смесь веществ непрерывно пропускают через неподвижную фазу. Очевидно, что этот метод непригоден для разделения близких по свойствам компонентов и используется обычно для. извлечения из смесей сильно сорбирующихся веществ.